四、透皮吸收檢測方法
(一)在體檢測方法
拉曼光譜人體測試方法
拉曼光譜是一種能夠反映分子結(jié)構(gòu)信息的散射光譜,通過對光譜中拉曼峰的位置、形狀和強度以及被測物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和含量之間的關(guān)系的分析,實現(xiàn)物質(zhì)的定性鑒別和定量分析?;驹砭褪羌す獯虻浇o定的樣品上,出射光里面既有瑞利散射光又有拉曼散射光。這時候經(jīng)過一個濾光片,把瑞利散射光給過濾掉,剩下的就只有拉曼光。 經(jīng)過光柵分光后在檢測器上以譜圖的形式檢測出拉曼光譜。可將激光束準確聚焦到檢測樣本上以獲得樣品的光譜信息,同時可以通過調(diào)節(jié)激光聚焦深度,對不同深度的物質(zhì)結(jié)構(gòu)信息進行分析,具有非侵入性、高空間分辨率、高準確率等優(yōu)點。
測試流程
圖3 拉曼光譜人體測試方法測試流程案例
測試案例
圖5 樣品組
配方通過促滲透的工藝升級,在涂抹完產(chǎn)品后三個時間點,通過拉曼特征吸收峰在不同皮膚深度的強度,驗證了美白活性物質(zhì)(煙酰胺)在配方升級后,透皮深度和濃度均提升。
結(jié)果呈現(xiàn)方式
案例1:某身體乳中煙酰胺的透皮吸收效果
結(jié)果解析:在使用樣品1小時后,取兩個位點做深度掃描,從相對強度趨勢圖可以看出,皮膚深度為55um依舊含有少量的煙酰胺。報告呈現(xiàn)方式:呈現(xiàn)透皮吸收的圖譜和熱力圖,描述產(chǎn)品的透皮吸收情況。
(二)體外檢測方法
熒光標記定位
功效成分在皮膚中靶向定位完全不同。譬如:防曬類的功效成分需要定位到皮膚表面(不透皮);保濕類功效成分需要定位到皮膚角質(zhì)層屏障;祛痘類功效成分需要定位到皮膚附屬器官;美白類功效成分需要定位到表皮基底層;抗皺類功效成分需要定位到真皮層成纖維細胞。 一般帶有氨基、羧基、羥基等活性基團的活性成分(比如蛋白多肽)容易結(jié)合FITC/CY等熒光染料,適合做此類測試。活性成分在熒光標記后在經(jīng)皮滲透一段時間,隨后制作組織切片,便能清晰觀察表征功效成分滲透情況及其滲透到的皮層。
測試案例
圖7 熒光標記定位案例示意圖1
圖8 熒光標記定位案例示意圖2
在案例實驗條件下,根據(jù)熒光顯微鏡觀察結(jié)果分析可知樣品作用豬皮0.5h、3h、6h、24h 均發(fā)生滲透行為,F(xiàn)ITC 標記的樣品穿過皮膚表皮層滲透至真皮層。
Franz擴散池
Franz擴散池為垂直式擴散池,離體豬皮將擴散裝置分為上下兩室,此種擴散池最為常用(見圖9)。擴散池法就是將離體豬皮安裝在擴散池上,在開啟磁攪拌子和恒溫水浴的情況下,向室中皮膚表面加入不同的樣品進行透皮實驗,定時取接收液,用適宜的分析方法測定有效成分的含量,通過計算累積滲透量、擴散百分比、回收率、滲透系數(shù)來評價化學(xué)物的滲透特性。
圖9 Franz擴散池結(jié)構(gòu)示意圖
結(jié)語
在化妝品行業(yè)中,對于透皮吸收評價策略的選擇具有重要性。它不僅與產(chǎn)品的功效宣稱緊密相關(guān),還與產(chǎn)品的安全性和消費者的使用體驗有所關(guān)聯(lián)。
通過不斷的研究和實踐,我們能夠更好地理解皮膚與化妝品成分之間的相互作用,助力化妝品企業(yè)為消費者提供更加安全、有效的產(chǎn)品。